第一節(jié) 金相顯微鏡
-1:yqF.x `+\+ 前面講述了顯微鏡的光學(xué)原理以及附件,下面將分類介紹一下各類研究用鏡檢術(shù)。在材料研究領(lǐng)域,反射式明場顯微鏡得到廣泛應(yīng)用,在此基礎(chǔ)上各種特殊的鏡檢方法也得到應(yīng)用,如暗場,偏光,相襯,干涉,熒光,這些鏡檢方法在高檔顯微鏡上均能同時實現(xiàn)。
+*DXzVC 一. 明視野觀察(Bright field)
c3`X19'%fM ?X]7jH<iw; 明視野鏡檢是大家比較熟悉的一種鏡檢方式,廣泛應(yīng)用于病理、檢驗,用于觀察被染色的切 片,所有顯微鏡均能完成此功能。在此不再贅述。
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二. 暗視野觀察(Dark field)
Sl S3P;@Rm 暗視野實際是暗場照明。它的特點和明視野不同,不直接觀察到照明的光線,而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線。因此,視場成為黑暗的背景,而被檢物體則 呈現(xiàn)明亮的像。暗視野的原理是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)像,微塵在強光直射通過的情況下,人眼不能觀察,這是因為強光繞射造成的。若把光線斜射它,由于光的反 射,微粒似乎增大了體積,為人眼可見。暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點是不讓光束由下至上的通過被檢物體,而是將光線改變途徑,使其 斜射向被檢物體,使照明光線不直接進入物鏡,利用被檢物體表面反射或衍射的光形成明亮圖像。暗視野觀察的分辨率遠高于明視野觀察,最高達0.02— 0.004mm。
X[(u]h` z./u;/: 三.相襯鏡檢法(Phase contrast)
G3OqRH |TkMrj0 在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過程中,相襯鏡檢術(shù)的發(fā)明成功,是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就。我們知道,人眼只能區(qū)分光波的波長(顏色)和振幅(亮度),對于無色通明的生物標本,當光線通過時,波長和振幅變化不大,在明場觀察時很難觀察到標本。
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"! 相襯顯微鏡利用被檢物體的光程之差進行鏡檢,也就是有效地利用光的干涉現(xiàn)像,將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹睿词故菬o色透明的物質(zhì)也可成為清晰可見。這大大便利了活體細胞的觀察,因此相襯鏡檢法廣泛應(yīng)用于倒置顯微鏡。
zo7Hm]W` U5Q `r7 1. 相襯鏡檢法在裝置上與明場不同,有一些特殊要求:
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