(一) 原理和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
O#r%>;3* 在日常生活中,室內(nèi)飛揚(yáng)的微粒灰塵是不易被看見(jiàn)的,但在暗的房間中若有一束光線(xiàn)從門(mén)縫斜射進(jìn)來(lái),灰塵便粒粒可見(jiàn)了,這是
光學(xué)上的丁達(dá)爾現(xiàn)象。暗視野
顯微鏡就是利用此原理設(shè)計(jì)的。它的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要是使用中央遮光板或暗視野聚光器,常用的是拋物面聚光器,使光源的中央光束被阻擋.不能由下而上地通過(guò)標(biāo)本進(jìn)入
物鏡。從而使光線(xiàn)改變途徑,傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上,標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射,散射的光線(xiàn)投入物鏡內(nèi),因而整個(gè)視野是黑暗的。在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像.并非物體的本身,所以只能看到物體的存在和運(yùn)動(dòng),不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。但被檢物體為非均質(zhì)時(shí),并大于1/2波長(zhǎng),則各級(jí)衍射光線(xiàn)同時(shí)進(jìn)入物鏡,在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu),但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運(yùn)動(dòng),這是普通顯微鏡(最大的分辨力為0.2um)所不具有的特性,可用以觀察活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)微粒的運(yùn)動(dòng)等。
=2x^nW (二) 制作中央遮光板
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5Va 普通顯微鏡只要聚光器是可以拆卸的,支架的口徑適于安裝暗視野聚光器,即可改裝成暗視野顯微鏡。在無(wú)暗視野聚光器時(shí),可用厚黑紙片制作一個(gè)中央遮光板,放在普通顯微鏡的聚光器下方的濾光片框上,也能得到暗視野效果。
poFg1 1.將顯微鏡聚光器調(diào)到最高位置,用低倍鏡對(duì)好
焦距。
apxph2yvS 2.取下
目鏡,從鏡筒中觀察并調(diào)節(jié)光闌的大小,使其與鏡筒中所見(jiàn)物鏡的視野相等。
e96k{C`j0 3.用厚黑紙剪制中央擋光板。外圈直徑與濾光片框架相同,中央部分的大小與調(diào)節(jié)好的光闌孔徑一樣(可用半透明的小紙片,放在通光孔處聚光鏡鏡面上,紙上顯示的光斑即為光闌的孔徑,再用圓規(guī)量取大小)。
#X"@<l4F 4.將中央擋光板放在濾光片框架上,開(kāi)大光闌進(jìn)行樣品觀察。
+"VP-s0 如需使用高倍鏡作暗視野觀察,應(yīng)按高倍鏡對(duì)焦后的視野大小重新制作中央擋光板。
hpk7 Anp 保存好各自制作的中央遮光板,以便在后面的實(shí)驗(yàn)中使用。
8dhUBJ0_ (三)使用方法
xkAK!uVy 1.把暗視野聚光器裝在顯微鏡的聚光器支架上。
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