摘 要
激光掃描共聚焦
顯微鏡是近十年發(fā)展起來的醫(yī)學(xué)圖象分析儀器,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于熒光定量測(cè)量、共焦圖象分析、三維圖象重建、活細(xì)胞動(dòng)力學(xué)參數(shù)監(jiān)測(cè)和胞間通訊研究等方面。其性能為普遍
光學(xué)顯微鏡質(zhì)的飛躍,是電子顯微鏡的一個(gè)補(bǔ)充。本文以美國(guó)Meridian公司的ACAS ULTIMA312為例簡(jiǎn)要介紹了激光掃描共聚顯微鏡系統(tǒng)的結(jié)構(gòu),功能和
生物學(xué)應(yīng)用前景。 關(guān)鍵詞 激光;共聚焦顯微鏡;粘附細(xì)胞分析與篩選(ACAS)
$';'MoS The Laser Scanning Confocal Microscopy System and its Biological Applications
i40r}?- \+GXUnkj Chen Yaowen ,Lin Jielong ,Lai Xiaoying ,Mei Pinchao
~\<ZWU<BE #2yOqUO\ (Shantou Uni.Med .College,Central Lab ,Shantou Guangdong 515031)
B>X+eK a,cDj Ahstract The Laser Scanning Confocal Microscopy is a new medical image analysis instrument ,which is developed in the last decade.Now it is widely applied in such fields as fluorescent quantitative measurement ,conpocal image andlyusis ,3-D reconstruction ,Kinetic signal monitioring of living cell ,cellcell communication researches ,etc .In this paper ,ACSA ULTIMA 312(Meridian Co,USA)is taken as an example to introduce the principle of confocal microscopy ,its funetions and biological applications.
MBcOIy[&A g/z9bOgIX Key words Laser Confocal Microscopy Adherent Cell Analysis and sorting(ACSA)
1:YDN.* U
YUIpe 激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning Confocal Microscopy ,簡(jiǎn)稱LSCM)是近代生物醫(yī)學(xué)圖象儀器的最重要發(fā)展之一,它是在熒光顯微鏡成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖象處理,從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象,以及在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化。已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)、解剖學(xué)、胚胎學(xué)、免疫學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)等領(lǐng)域[1、2、3],對(duì)生物樣品進(jìn)行定性、定量、定時(shí)和定位研究具有很大的優(yōu)越性,為這些領(lǐng)域新一代強(qiáng)有力的研究工具。
Z+t?ah00 4)Pt]#Ti 創(chuàng)建于1983年的美國(guó)Meridian公司,在90年代推出的“激光掃描共聚焦顯微鏡”這一項(xiàng)具有劃時(shí)代的義意的高科技產(chǎn)品,曾獲得美國(guó)“政府新產(chǎn)品獎(jiǎng)”和兩次“高科技領(lǐng)先技術(shù)獎(jiǎng)”,它能達(dá)到每秒120幅畫面的高速掃描激光共聚焦觀察,可提供實(shí)時(shí),真彩色的激光共聚焦原色圖象。我院最近引起的ACAS uLTIMA312是Meridian公司最新的高科技產(chǎn)品,為同類儀器中檔次最高、功能最全的精密儀器。現(xiàn)以該儀器為例介紹激光掃描共聚焦顯微鏡系統(tǒng)及其在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用。
q(.%f3( Cy6[p 1、激光掃描共聚焦顯微鏡成像原理及組成
BqZLqGOKu .E;6Xx_+r 有關(guān)共聚焦顯微鏡的某些技術(shù)原理,早在1957年就已提出,二十年后由Brandengoff在高數(shù)值孔徑
透鏡裝置上改裝成功具有高清晰度的共聚焦顯微鏡[5],1985年Wijnaendts Van Resandt發(fā)表了第一篇有關(guān)激光掃描共聚焦顯微鏡在生物學(xué)中應(yīng)用的文章,到了1987年,才發(fā)展成現(xiàn)在通常意義上的第一代激光掃描共聚焦顯微鏡。
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