中國科大提出一種超越衍射極限的無標(biāo)記暗場成像新技術(shù)
中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)張斗國教授課題組，結(jié)合微納光學(xué)的光場調(diào)控技術(shù)和計(jì)算光學(xué)顯微成像技術(shù)，提出了一種基于光子晶體隨機(jī)散斑照明的超越衍射極限、無標(biāo)記暗場成像新技術(shù)。相關(guān)研究成果以“Planar device–enabled speckle illumination for dark-field label-free imaging beyond the diffraction limit”為題，于2月20日以直接投稿的方式發(fā)表在綜合性國際學(xué)術(shù)期刊Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America (PNAS)。 ! ~V^GlY
該項(xiàng)研究課題組利用前端物理域的亞波長結(jié)構(gòu)光子晶體光場調(diào)控特性，實(shí)現(xiàn)了大角度和全內(nèi)反射表面波的隨機(jī)暗場散斑照明；有機(jī)結(jié)合后端數(shù)字域的信息處理技術(shù)，最終實(shí)現(xiàn)高對(duì)比度、高分辨率的無標(biāo)記暗場和表面切片成像。該成像技術(shù)不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng)對(duì)準(zhǔn)和精準(zhǔn)預(yù)知的照明模場，成像系統(tǒng)架構(gòu)簡潔，平面型光子晶體器件體積小、易于集成，直接兼容傳統(tǒng)的明場顯微鏡。這項(xiàng)成像技術(shù)的提出將拓展暗場顯微鏡的潛在應(yīng)用領(lǐng)域，并提供傳統(tǒng)暗場顯微技術(shù)所不能看到的樣品細(xì)節(jié)信息。 h@o6=d=4
[attachment=131570] lD-2 5~YV
圖1.暗場散斑照明器件的原理示意圖及超分辨暗場成像效果圖 ap2g^lQXq
該工作中，張斗國教授課題組提出利用一維光子晶體和多模光纖波導(dǎo)等微納結(jié)構(gòu)組成的平面型器件來實(shí)現(xiàn)隨機(jī)暗場散斑照明的功能，其設(shè)計(jì)原理示意圖如圖1a所示。研究人員利用前焦面和后焦面成像系統(tǒng)對(duì)該平面器件生成的照明光場特性進(jìn)行表征分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與理論設(shè)計(jì)吻合。進(jìn)一步，將所制備的平面型隨機(jī)暗場散斑照明器件用作傳統(tǒng)明場顯微鏡的載物平臺(tái)，無需對(duì)成像系統(tǒng)進(jìn)行任何修改，就可以實(shí)現(xiàn)隨機(jī)暗場散斑照明顯微鏡（RDSIM）的搭建。通過拍攝200幀不同散斑照明的樣品圖像，結(jié)合Blind-SIM重建算法，就可以重構(gòu)出超分辨率圖像。實(shí)驗(yàn)中利用波長633nm的光對(duì)直徑200nm的不同間距聚苯乙烯球進(jìn)行成像。通過對(duì)比RDSIM，傳統(tǒng)暗場，明場以及電鏡的成像效果，驗(yàn)證了RDSIM具有高對(duì)比度、高分辨率的暗場成像性能（如圖1c）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法將無標(biāo)記暗場成像的空間分辨率提升了1.55倍，突破了該成像系統(tǒng)的阿貝衍射極限分辨率。同時(shí)，研究人員利用聚合物納米線驗(yàn)證了該系統(tǒng)在切換工作波長后具有表面切片成像的能力，如圖1d所示。 $\|Q+
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