當紫外光照射某一物質(zhì)時,該物質(zhì)會在極短的時間內(nèi),發(fā)射出較照射波長為長的光。而當紫外光停止照射時,這種光也隨之很快消失,這種光稱為熒光。熒光是一種光致發(fā)光現(xiàn)象。如前所述,分子吸收了某一波長區(qū)的輻射能后,它的電子可躍遷至激發(fā)態(tài),然后以熱能形式將這一部分能量釋放出來,本身又恢復(fù)到基態(tài)。如果吸收輻射能后處于電子激發(fā)態(tài)的分子以發(fā)射輻射的方式釋放這一部分能量,即為光至發(fā)光。再發(fā)射的波長與分子所吸收的波長可以相同,也可以不同。物質(zhì)所吸收光的波長和發(fā)射的熒光波長與物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系。同一種分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì),用同一波長的激發(fā)光照射,可發(fā)射相同波長的熒光,但其所發(fā)射的熒光強度隨著該物質(zhì)濃度的增大而增強。利用這些性質(zhì)對物質(zhì)進行定性和定量分析的方法,稱為熒光光譜分析法,也稱為熒光分光光度法。這種方法具較高的選擇性及靈敏度,試樣量少,操作簡單,且能提供比較多的物理參數(shù),現(xiàn)已成為生化分析和研究的常用手段。
S|?Ht61k [Y=X^"PF 1. 熒光的產(chǎn)生及其與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系:
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